ヒアルロン酸測定キットの特徴

１．測定原理
HA固層化プレートに、HAを含む試料及びビオチン標識ヒアルロン酸結合タンパク（Biotin-HABP）を添加し、固層化HAに結合したBiotin-HABPをHRP-Avidin及び発色基質により検出する競合法です。

２．測定範囲
濃度3.13～200ng/mLのヒアルロン酸を測定します。

３．各種分子量のHAの反応性
HABPを用いたサンドイッチ法と異なり、競合法ではHAの分子量による影響を受けにくいことが知られています^1-3)。
平均分子量7.4～2367kDaのHAに対し、同等の反応性を示します。
2.8kDa(14糖）以下のHAオリゴ糖では反応性が低下していき、1.6kDa（8糖）のHAには反応しません。

４．サンドイッチ法との比較
市販のサンドイッチ法による測定キットを使用した結果、HAの分子量により反応性が異なり、7.4kDa以下の分子量では
ほとんど反応しませんでした。

分子量の異なるHAを測定した結果
サンドイッチ法では、測定するHAの分子量による影響を大きく受け、低分子量では実際の濃度よりも低く、
高分子量で実際の濃度より高い測定結果となります。

競合法（ヒアルロン酸測定キット）

分子量(kDa)	理論値(ng/mL)	実測値(ng/mL)	理論値に対する％
251	12.5	12.3	98
63	12.5	12.0	96
7.4	12.5	11.3	90

サンドイッチ法(A社製キット）

分子量(kDa)	理論値(ng/mL)	実測値(ng/mL)	理論値に対する％
251	10.0	14.1	141
63	10.0	7.6	76
7.4	10.0	6	6

５．特異性
ヒアルロン酸を特異的に認識し、他のグリコサミノグリカンとはほとんど交差反応しません。
高濃度のCS-B：デルマタン硫酸には弱い反応性を示します。
（CS：コンドロイチン硫酸、HS：ヘパラン硫酸、Hep：ヘパリン、KS：ケラタン硫酸、KPS：ケラタンポリ硫酸）

６．その他の性能
　血清・血漿の測定値、再現性、希釈直線性、添加回収試験の結果につきましては、取扱説明書をご覧ください。

キットの構成

使用方法

取扱説明書をご覧ください。

貯法

冷凍（-20℃以下）

引用文献

1) Haserodt S et al., A comparison of the sensitivity, specificity, and molecular weight accuracy of three different commercially available Hyaluronan ELISA-like assays. Glycobiology. 21(2):175-183. 2011.

2) Maeda H et al., A competitive enzyme-linked immunosorbent assay-like method for the measurement of urinary hyaluronan. Biosci Biotechnol Biochem, 63(5):892-895, 1999.

3) Yuan H et al., Molecular mass dependence of hyaluronan detection by sandwich ELISA-like assay and membrane blotting using biotinylated hyaluronan binding protein. Glycobiology. 23(11):1270-1280. 2013.